Séparation des caséines et autre constituant du lait, Détermination de sa concentration, Séparation des acides aminés formant la caséine.

Séparation des caséines et autre constituant du lait, Détermination de sa concentration, Séparation des acides aminés formant la caséine.

II-Auteur:

TACHEKAFT Kenza   kenza.tachekaft@gmail.com

ROUBHI Saoussen    sassou.roubhi@gmail.com

L1 SV 4a

III- Résumé:

Le but de ce TP est d'analyse la caséine présente dans le lait pour  cela nous utiliseront 3 techniques :

Méthode de la précipitation au point isoélectrique : consiste a séparer les différents composant du lait.  

Dosage colorimétrique : permet de déterminer la concentration en caséine de l’hydrolysât  

Chromatographie de partage sur couche mince : pour pouvoir déterminer les acides aminée présent dans l’hydrolysât de tri peptides.

IV-Abréviations:  

m=masse(g).

C= Concentration molaire (mol /L).

ρ= concentration massique (g/L).

r= rendement.

aa = acide aminée.

g= grammes.

V- Introduction:

1Litre de lait de vache est composé de 35g de protéines 48g de glucides  36g de lipides des vitamines et 1.2g de calcium. Ici se sont les protéines qui nous intéresse, plus spécifiquement la caséine qui constitue 80% des protéines du lait nous allons calculer sont rendement en séparant les différents composant du lait calculer sa concentration grâce à une colorimétrie  et séparer les différents acide aminées de cette protéine.

VI- Résultat et Discutions :

Lors de l'isolation de la caséine pour 20mL de lait, nous avons obtenu un rendement de 123 % grâce au calcul suivant :  

 m (théorique)=32g sachant qu'il y a 80 %de caséine dans le lait donc nous faisons le calcul suivant (80*32)/100= 25,6 de caséine

m (obtenue)=10,63g pour 20mL de lait donc : 1*10,69/20*10-3= 31,5G DE CASÉINE

Puis nous  calculons le rendement : r= m théorique /m obtenue = 21,5/25,6= 1,23*100=123 %

Le résultat obtenu lors du calcul de la masse théorique n’est pas le même que celui réaliser avec la masse obtenue cela peut être dû au fait que le Ph ne soit pas précisément égale à 4.6 ou que la masse de caséine obtenue contiennent encore des molécule d’eau ou encore qu’il y est encore présence de molécule de lait qui ont un pHi proche de la caséine donc le rendement est forcément plus élevé que le résultat attendu.

Tout d’abord nous calculons la concentration massique en caséine :

  C (tyrosine) = ρ /M = 0.185/161=1.02*10-3 mol/L-1.

A partir de cette concentration nous calculons la concentration molaire que nous divisons par 3 :   ρ (caséine) = ρ (tyrosine) / 3 = 5.2*10-2 g/L.

Nous devons maintenant divisé la concentration molaire aussi par 3 car on sait qu’une molécule de caséine contient 3 molécules de tyrosines :

C (caséine) = C (tyrosine) / 3 = 3.4*10-4 mol/L-1.

●Calcule de Rf des acides aminés utilisés sur la chromatographie :

●Calcule de Rf des mélanges utilisés sur la chromatographie :

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