TP BIOCHIMIE

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MATERIEL        PRODUITS[pic 2]

• Polarimètre
• 1 tube polarimétrique (10 ou 20 cm)
• 4 erlens de 100 mL
• 2 burettes de 25 mL
• 1 éprouvette de 25 mL ou un entonnoir
• Pipettes : 2 de 1 mL et 2 de 2 mL
• 1 agitateur magnétique

• Solution inconnue de sucres
• Diiode (I2) 1/40 mol.L-1
• Thiosulfate de sodium (Na2S2O3) environ 1/20 mol.L-1
• Hydroxyde de sodium (NaOH) 2 mol.L-1
• Acide sulfurique (H2SO4) 3 mol.L-1
• Thiodène 10 % (indicateur de diiode)

Les sucres simples ou oses sont des aldéhydes ou des cétones polyhydroxylés (aldoses ou cétoses). La présence dans leur molécule de plusieurs carbones stéréogènes leur confère le pouvoir de dévier le plan de la lumière polarisée, à condition que la molécule ne présente pas de symétrie. Dans cette étude, deux méthodes de dosage seront utilisées, l'une faisant appel aux propriétés chimiques des oses, l'autre à leurs propriétés optiques.

1. DOSAGE DES ALDOSES PAR LE DIIODE EN MILIEU ALCALIN

1. Principe

Le diiode en milieu alcalin oxyde les aldoses en acides monocarboxyliques correspondants (acides aldoniques) alors que dans les mêmes conditions les cétoses ne réagissent pas. Cette méthode, due à WILLSTATTER et SCHUDEL, permet donc le dosage spécifique d'aldoses en présence de cétoses. Les  réactions mises en jeu sont les suivantes :

1. Dans un premier temps, il y a dismutation du diiode en milieu alcalin :

I2   +  2 OH-  →  IO-  +  I-  + H2O

et oxydation des aldoses en aldonates correspondants :

IO-  +  R-CHO + OH-  →  R-COO-  +  I- + H2O

La solution ne doit pas être trop alcaline, pour éviter la transformation des hexoses et une oxydation plus poussée des acides produits, mais suffisamment pour permettre la dismutation du diiode et la neutralisation de l'acide formé.

1. Dans un deuxième temps, le diiode non utilisé est régénéré en milieu acide :

IO-  +  I-  +  2 H+  →  I2   + H2O

1. Enfin, le diiode régénéré est dosé par le thiosulfate de sodium :

I2   +  2 S2O3        →  2 I-  + S4O6[pic 3]

Ainsi par différence avec un témoin, effectué dans les mêmes conditions, on peut en déduire la quantité de sucres réducteurs présents dans la solution.

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