Le mode d’action des enzymes et la notion de spécificité de substrat

TP n°9 : Le mode d’action des enzymes et la notion de spécificité de substrat.

L'importance des enzymes est capitale dans le monde vivant. En effet, dans un organisme vivant, toute réaction métabolique est nécessairement catalysée par une enzyme. Nous allons voir au cours de cette activité , dans une première partie , le mode d’action des enzymes à l’aide du logiciel enzymes et dans une deuxième partie , nous allons réaliser des expériences mettant en évidence  la notion de spécificité de substrat des enzymes. 

Partie 1

I) Influence de la concentration en enzymes sur le fonctionnement de la réaction enzymatique.

1. - Ouvrir le logiciel «Enzymes»
2. - Choisir «amylase» comme enzyme et «amidon» comme substrat
3. - Fixer T° à  42°C et pH à 7
4. - Dans l’onglet graphique choisir «V. initiale = f (enzyme)»
5. - Prendre une valeur de substrat =10
6. - Cliquer sur «Démarrer»
7. - Refaire pour substrat = 50 puis 100
8. - Capturer l'image en faisant une impression écran pour l'insérer dans votre compte rendu, rogner et mettre un titre.
9. - Rédiger une conclusion en justifiant vos remarques. 

II) Influence de la concentration de substrat sur le fonctionnement d'une enzyme.

1. - Dans l’onglet graphique choisir «V. initiale = f (substrat)»
2. - Prendre une valeur d’enzyme = 1 , un T° de 42°C et un pH de 7
3. - Cliquer sur «Démarrer»
4. - refaire pour enzyme =5 puis 10
5. - Capturer l’image en faisant une impression écran pour l’insérer, rogner et mettre un titre.
6. - Rédiger une conclusion en justifiant vos remarques.

Conclusion générale de la partie 1:  A l’aide de vos différentes conclusions et justifications, rédigez un texte expliquant le mode d’action des enzymes.

Partie 2

Expériences à réaliser:

La saccharase est une enzyme de l'intestin grêle qui catalyse l'hydrolyse de son substrat, le saccharose, en glucose et fructose. La levure saccharomyces cerevisiae secrète dans son milieu une saccharase qui peut être facilement recueillie par filtration d’une culture de levures.

Le saccharose est un diholoside de formule brute C12H22011, tout comme le maltose et le lactose.

[pic 1]

1. Préparer 4 tubes à essais numérotés de 1 à 4.

2. Ajouter 3 mL d'eau distillée dans le tube 1 ; 3 mL de maltose à 1 % dans le tube 2 ; 3 mL de lactose à 1% dans le tube 3; 3 mL de saccharose à 1 % dans le tube 4.

3. Prenez 4 bandelettes de glucotest et numérotez-les de 1 à 4.

3. Remplir les tubes 1 à 4 avec 1 mL de saccharase et faites immédiatement après pour chaque tube, le test de présence de glucose en trempant une bandelette de glucotest dans chaque solution.

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