TP physiologie des grandes fonctions

TP 1 : Hémolyse

I/ INTRODUCTION

Les cellules des êtres vivants sont le siège d’échanges incessants d’eau ou de substances dissoutes, ces échanges se font grâce aux différentes perméabilités de la membranes.

Dans ce TP nous allons étudier le comportement des hématies de rat lorsqu’elles sont plongées dans des solutions d’osmolarités différentes.
En effet nous allons étudier le phénomène d’osmose qui est le phénomène de diffusion de l’eau à travers une membrane semi-perméable.
Ainsi nous allons pouvoir étudier la relation qu’il y a entre les entités chimiques et la membrane.

II/ MODE OPÉRATOIRE

Nous allons donc immerger dans des composés chimiques divers des hématies de rat en suspensions. Afin de pouvoir réaliser l’étude du comportement des hématies dans différentes concentrations de NaCl, nous partons d’une solution initiale à 12 %o, que nous diluerons pour obtenir des concentrations de 9, 6 et 3%o.

Nous cherchons à préparer des solutions de 8 ml chacune pour cela il nous faudra donc à ce stade dilluer notre solution initiale de NaCl 12 %o .

On sait que Ci*Vi = Cf*Vf , on cherche ici le Vi soit :

 Vi = [pic 1]

Solution NaCl à 9 ‰ = 6 ml de NaCl 12 ‰ + 2 ml d’eau distillée

Solution NaCl à 6 ‰ = 4 ml de NaCl 12 ‰ + 4 ml d’eau distillée

Solution NaCl à 3 ‰ = 2 ml de NaCl 12 ‰ + 6 ml d’eau distillée ( Vi = = 2ml )[pic 2]

De plus , nous disposons de solutions de glycérol , d’urée et de glucose à 5,5% pour étudier la réactions des hématies face à différents composés.

On preparera donc 8 tubes de 0,5 mL pour tester la réactions des hématies :

Tube 1 : Sérum physiologique . Ce tube nous servira de témoin pour notre expérience.

Tube 2 : Solution de NaCl 3%o

Tube 3 : Solution de NaCl 6%o

Tube 4 : Solution de NaCl 9%o

Tube 5 : Solution de NaCl 12%o

Tube 6 : Solution de Glucose 5,5%

Tube 7 : Solution d’Urée

Tube 8 : Solution de Glycérol

Dans chacun de nos tubes on ajoutera 2 gouttes de la suspension d’hématies de rats à l’aide d’une pipette pasteur.

On a observé la couleur et l’opacité de chaque tube puis nous avons prélevé le contenu des tubes avec une pipette pasteur afin de faire l’observation microscopique.

Et pour finir nous avons passé les tubes dans la centrifugeuse afin de confirmer nos premiers résultats.

III/ RÉSULTATS

Observation macroscopique :

Nous cherchons à observer à l’oeil nu si il y a eu hémolyse.

De fait, si les préparation sont translucides, c’est-à-dire si on peut, par exemple , lire un texte au travers, alors on supposera qu’il y a hémolyse .

Si au contraire la préparation nous apparaît trouble, nous supposerons qu’il n’y a pas eu hémolyse.

[pic 3]

Cette première observation macroscopique ne nous permet pas de nous prononcer avec certitude sur les phénomènes qui se seraient produits dans les tubes.

Nous allons appuyer nos observations à l’aide d’une deuxième observation macroscopique, faisant suite a une centrifugation.

Ces préparations sont centrifugé durant 10 minutes à 3000 tour/ minute. Cette centrifugation nous permettra d’apporter un stade de vérification supplémentaire.

Rassemblement des résultats au seins d’un Tableau:

Calcules des concentrations osmotiques des solutions testées en 2, 3, 4, 5 et 6 .

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