ANALYSE BACTERIOLOGIQUE D’UNE EAU DE BAIGNADE

ANALYSE bactériologique D’UNE EAU de baignade

Introduction :

Les eaux de baignade rassemblent les eaux de surface (salées ou non), dans lesquelles les autorités estiment qu’un grand nombre de personnes sont attendues, et où la baignade n’est ni déconseillée ni interdite. Celles-ci sont essentiellement fréquentées durant la saison balnéaire, période où une forte affluence est prévisible. Cette saison d’étend du 15 juin au 15 septembre en mer et du 1er juillet au 31 aout pour les eaux douces.

Le contrôle sanitaire des eaux de baignades s’effectue sur ces périodes, à raison d’au moins 4 analyses par saison, séparées dans le temps par au moins un mois, afin de prévenir les usagers d’éventuels dangers pour la santé. En fréquentant les eaux de baignade, il est possible de contracter un large éventail d’infections, de la gastro-entérite jusqu’à des infections pulmonaires. Responsables de celles-ci sont une grande variété de micro-organismes (algues, bactéries, virus).  

Au cours de ce TP, nous allons rechercher et dénombrer les paramètres dictés par la règlementation (directive 2006/7/CE du 15 février 2006) afin de conclure sur la qualité de l’eau à un moment donné. Cependant, pour pouvoir classer les plages selon la même directive, il est nécessaire d’examiner les résultats d’analyses effectuées sur 4 années consécutives. Les échantillons utilisés ont été prélevés selon l’arrêté du 04/10/2011. Ceux-ci doivent être effectués dans la zone la plus fréquentée par les baigneurs, zone où le  risque de pollution est le plus élevé.

Les paramètres recherchés sont donc les entérocoques et Escherichia coli. Cependant, les méthodes de dénombrement de E.coli permettent également celui des coliformes totaux. Nous exprimerons aussi donc le résultat de cette recherche.

Les coliformes totaux rassemblent les coliformes et les coliformes fécaux. Les coliformes sont les micro-organismes fermentant le lactose avec production d’acide et de gaz. Ils se développent et aérobiose à 36°C en bouillon bilié lactosé au vert brillant (BBLVB). Les coliformes fécaux (ou thermotolérants) présentent les mêmes caractéristiques, mais à 44°C. Ils proviennent généralement des matières fécales des homes ou des animaux.

Les E.coli sont des coliformes fécaux produisant de l’indole à partir de tryptophane à 44°C. Ceux-ci sont dénombrés séparément en raison de leur potentiel pathogène (gastro-entérites).

Les coliformes seront ici dénombrés grâce à deux méthodes, la dilution en milieu liquide et le colilert, une méthode alternative à la norme, certifiée par l’AFNOR.

Les entérocoques sont les micro-organismes pouvant se développer en aérobiose à 44°C et possédant une glucosidase permettant d’hydroliser le 4-méthylumbélliféryl-β-D-glucoside en présence d’acétate de thallium, d’acide nalidixique et de TTC. Les entérocoques correspondent à certaines espèces du genre Enterococcus et Streptococcus. Ils sont indicateurs de contamination fécale de l’eau.

L’interprétation des résultats obtenus sera effectuée grâce à des valeurs guides et des valeurs impératives :

A la suite de ces dénombrements, nous conclurons donc sur la qualité de l’eau de baignade de l’échantillon n°2 à un moment précis dans le temps, sans pouvoir conclure sur le classement du site de baignade.

FICHE PROTOCOLE ANALYSE D’UNE EAU DE BAIGNADE

Identification de l’échantillon : n°2

I- Dénombrement des coliformes totaux et Escherichia coli 

I-1 Par méthode NPP en tube

I-2 Par méthode Colilert

II-Recherche et dénombrement des entérocoques par méthode miniaturisée

FICHE LECTURE 1 ANALYSE D’UNE EAU DE BAIGNADE

Identification de l’échantillon : n°2

I- Dénombrement des coliformes totaux et Escherichia coli

I-1 Par méthode NPP en tube

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