TP: Chromatographie et identification

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TP n°5Chromatographie et identification

Partie A : Identifier les colorants alimentaires d’un sirop

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Pouah !Quelle horreur cebreuvagevert !

Principe d’une Chromatographie sur Couche Mince

La chromatographie sur couche mince est une technique permettant de séparer et d’identifier les constituants d’un mélange.

Elle est basée sur les différences d’affinité des espèces chimiques étudiées pour deux phases : la phase fixe et la phase mobile (éluant).

L’éluant entraîne les espèces à analyser, alors que la phase fixe les retient.

- Plus une espèceest soluble dans l’éluant, plus elle est facilement entraînée.            Couvercle[pic 6][pic 7]

- Une espèce est plus ou moins retenue par la phase fixe.                                               Cuve à

chromatographie[pic 8]

Pour réaliser une CCM, on utilise :                                                                             Papier Whatman[pic 9]

-un solvant (ou un mélange de solvants) appelé éluant :                                          Ligne de dépôt[pic 10]

c’est la phase mobile ;Eluant[pic 11]

-un support solide fixe, appelé phase fixe :

soit une bande de papier Whatman, soit une plaque de silice.

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REALISERProtocole expérimental

a)Dépôt des échantillons.

Sur une bande de papier-filtre, 7cm x 14cm, tracer, au crayon à papier, un trait fin horizontal à 1cm du bas

dela bande.

Repérer sur ce trait, appelé ligne de dépôt, 4 points régulièrement espacés.

A l’aide de pics à apéritif, déposer une microgoutte des produits à analyser :le colorant

alimentairerouge,  le colorant alimentaire jaune E102, le colorant alimentaire bleuE131 et le colorant vert

ayant servi à colorer le sirop.

Laisser sécher.

b) Préparation de la cuve.

Verser 10 mL d’éluant(mélanged’éthanol et d’une solution de chlorure de sodium à 40g.L-1) dans le fond      

                 de lacuve .

Fermer la cuve pour la saturer en vapeurs de solvant.

c)Elution.

Placer la feuille de papier dans la cuve, après lui avoir donné la forme d’un cylindre et avoir agrafé les bords.

Veiller à ce qu’elle reste droite et qu’elle ne touche pas les bords. D’autre part la ligne de dépôt doit être

située hors du solvant.

Fermer la cuve. Ne pas la déplacer !

Laisser migrer jusqu’à ce que l’éluant arrive à environ 1cm du haut de la bande.

d) Obtention du chromatogramme.

Sortir la bande de papier et repérer au crayon le front de l’éluant. Sécher à l’aide du sèche cheveux

Analyse d’un chromatogramme

-Chaque tache obtenue correspond à une espèce chimique.

-Pour un éluant donné et une phase fixe donnée, la hauteur h de migration est caractéristique de l’espèce : on identifie chaque espèce par son rapport frontal Rf :

Rf = [pic 13]               h : distance parcoure par l’espèce, à partir de la ligne de dépôt

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