Dosage de l'azoe par méthode Kjehldall

MOREAU Camille
DAMBRINE Zoée

ANATS1

Compte rendu du TP : Détermination de la concentration en protéines dans le lait en poudre par la méthode de Kjeldahl

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Travaux pratiques du 26 novembre 2018

1. Objectif 

 Calculer la teneur en protéines du lait en poudre.

1. Principe 

 L’azote organique est minéralisé en ammonium par minéralisation en milieu acide et oxydant, à chaud, en présence des catalyseurs. La minéralisation est alcalinisée pour former de l’ammoniac. Ce dernier est distillé par entraînement à la vapeur et est recueilli dans une solution acide. En fonction de l’acide utilisée, un dosage direct (acide borique) est réalisé ainsi qu’un dosage en retour (acide sulfurique.

1. Matériel et mode opératoire

Prise d’essai

Prélever 2 mL de lait (voir calculs pour explications)

Minéralisation

Introduire les 2 mL de lait dans un Matra de Kjeldahl muni d’un dispositif régulateur d’ébullition, ajouter une pastille de catalyseur ainsi que 10 mL d’acide sulfurique concentré à 95%.
Placer un entonnoir sur le ballon avec la tige plongeant dans le col.
Porter à ébullition et évaporer jusqu’à apparition de fumées blanches.
Forcer l’ébullition pendant deux heures.
Laisser refroidir à température ambiante.

Si la minéralisation est incomplète, l’opération doit être recommencé en diminuant le volume de lait prélevé ou en effectuant une dilution de celui-ci

Distillation

Transvaser dans un appareil de distillation le Matra, effectuer la distillation.
Admettre la vapeur qui assure l’entraînement de l’azote ammoniacal.
Procéder au dosage direct.

Dosage direct

Recouvrir 200 mL d’environ du distillat dans un récipient contenant 10 mL de solution d’acide borique et 3 à 4 gouttes d’indicateur (rouge de méthyl avec du vert de bromocrésol dans éthanol).
Réaliser un dosage volumétrique avec une burette graduée contenant de l’acide sulfurique.
Relevé les deux volumes équivalents de l’essai (deux volumes) ainsi que le volume à l’équivalence de l’essai à blanc (c’est-à-dire sans poudre de lait)

Dosage en retour

Procéder comme pour le précédent mais au lieu d’utiliser le rouge de méthyl avec du vert de bromocrésol, n’utiliser que du rouge de méthyl. Doser cette fois ci avec non pas de l’acide sulfurique mais plutôt avec de l’hydroxyde de sodium afin de corriger les résultats de burette du dosage précédant.

1. Résultats

• Dosage direct

• Dosage en retour

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