TP N° 1 Enzymologie : Réalisation d’une courbe d’étalonnage

Nom : Morsli                                                        Date : 22/10/2017

Prénom : Djilali Seghir

Groupe : G7

TP N° 1 Enzymologie : Réalisation d’une courbe d’étalonnage

pour le dosage de l’activité protéasique

1. Résultats :

1. La concentration :

Pour établir le courbe d’étalonnage on doit d’abords calculer les différentes concentrations de Tyrosine dans chacun des tubes.

Pour les calculer on utilise la relation de conservation de matière suivante :

A l’équilibre :

        n1=n2

        C1*V1 = C2*V2  🡺 [pic 1]

On a comme donné :

        V2 = 3.5 mL

        C1 = 0.1 mg/ml

Par application de la relation au-dessus on obtient les résultats suivants :

1. L’absorbance obtenus :

Traçage de la courbe de la fonction Abs = f(concentration) :

[pic 2]

1. Discussion :

La courbe d’étalonnage est une courbe de référence qui permet de retrouver la concentration inconnue de la tyrosine à partir de la mesure de l’absorbance.

Théoriquement elle existe une relation linéaire entre l’absorbance et concentration représenté par la relation suivante :

[pic 3]

Ce qui implique que la courbe d’étalonnage est une droite.

où k représente la pente de la droite, on peut la calculer par la relation suivante :

[pic 4]

La relation proportionnelle entre la concentration et l’absorbance est due à le fait que par l’augmentation de concentration le nombre de molécules de tyrosine augmente et donc empêche le passage des rayons UV-Visible  

Mais la courbe qu’on a obtenu n’est pas sous forme d’une droite mais un nuage des points qui sont très proche les uns aux autres de manière de former une sorte d’une droite, la question qui se pose maintenant c’est pourquoi il y a une différence entre le théorique et le pratique ?

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