Analyses microbiologiques de l'eau

Mohammedi lina ,Groupe MicA

   Rapport d’analyses microbiologiques d’eau de baignade

Les étudiants de la faculté de Montpellier ont analysé l'eau du ruisseau coulant au bas du hameau dit "Mas Thomassy", en contrebas du Plan des 4 Seigneurs. Ce hameau est situé sur la commune de Montpellier, et n'est pas raccordé au réseau d'assainissement collectif. Cette eau est analysée en laboratoire par différents procédés d'identification et est comparée aux normes microbiologiques. Il est important de respecter les normes pour des questions d'hygiène et de santé. On recherche certains pathogène au sein des matrices aquatiques tels que certains pathogène issus de l’eau de baignade.

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Matériel et méthode :

On utilisera un échantillon de 100 ml d’eau du ruisseau.

Comme méthode on a utilisé la filtration qui consiste à retirer des particules en suspension dans l'eau. Il s'agit d’un procédé physique de séparation physique-liquide au travers un milieu poreux que l’on appelle filtre.dans notre expérience on utilise 100 ml de l’échantillon pour observer et dénombrer les germes ,

pour les coliformes on prépare des membranes qui doivent être déposer dans le sens de filtration dans des boîtes petri contenant un milieu TTC et les incuber à 37°C (coliformes

totaux) et une boite à 44°C (coliformes fécaux) pendant 24 h,pour les streptocoque on utilise le milieu Slanetz et incuber à 37°C pendant 24 ou 48h ,le milieu chapman est sélectif au staphylocoque ,après filtration on incube à 37°C pendant 24h.

Test staphylocoagulase Le test de coagulase en tube est effectué pour détecter la coagulase libre,il est utilisé pour indiquer le type de staphylocoque, en principe repiquer une colonie jaune du milieu chapman (staphylocoque) et ensemencer dans un tube hémolyse stérile contenant 0,5 ml du plasma de lapin et incuber à 37°C pendant 2 à 3 heures ,se test est utilisé pour différencier Staphylococcus aureus (positif) des staphylocoques coagulases négatifs

La technique de dilution en cascade est utilisé afin de réaliser plusieurs dilution décimales, qui seront ensuite ensemenser sur une gélose GNO A l’aide de la technique des gouttes, déposer sur chaque rangée 3 gouttes de chaque dilution , ce qui permet de compter la moyenne du nombre de colonie et le dénombrement de la flore total.

Milieu de culture et référence :

Afin de rechercher les coliformes fécaux et totaux, nous utilisons le milieux TTC. Nous utiliserons différentes températures afin de favoriser le développement de certains pathogènes. A 37°C pour développer les coliformes totaux et à 44°C pour les coliformes fécaux.

calculs :

Interprétation statistique : il s’agit d’une interprétation probabiliste

-aprés ensemensement , on note pour chaque essais si c’est positif ou négatif

-pour chaque dilution ,on effectue un chiffre égal à la somme des tubes positifs

- pour déterminer la concentration en micro-organisme par ml on choisit le nombre le plus grand qui est inférieur à 330 et lire le NPP qui correspond sur la table de Mac Grady

-déduire la concentration en appliquant :

NPP

[ N ］＝ 一一一        ✖ Fd

volume inoculum

NPP= nombre le plus probable obtenu par lecture de la table de Mac Grady

V inoculum= 1 mL

Fd= facteur de la dilution

dans la majorité des groupes ils ont trouvé :

le nombre le plus probable c’est 330 car (＜330 ）pour la dillution10-3 ,dans la table de mac grady le NPP correspond a 330 est 25.

N= NPP /V inoculum xFd N= 25 / 10-3

N= 25 X  103 micro-organismes par mL

Résultats:

Afin de simplifier la lecture des résultats, nous avons fait un tableau contenant les résultats de tous les groupes d'étudiants pour pouvoir par la suite réaliser une moyenne. Cette moyenne nous permet d’être plus précis et de la comparer aux normes en vigueur.

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