Etude des contractions utérines chez le rat: action de l'ocytocine

Etude des contractions utérines : Action de l’ocytocine

1. Introduction

      Lors de notre dernier TP, nous nous sommes intéressés à l’utérus et plus précisément à sa motricité, c’est-à-dire l’ensemble des fonctions qui assurent les mouvements de ce dernier. L’utérus est l’un des muscles les plus puissants du corps humain (chez la femme). La paroi utérine possède en effet 2 tuniques : l’endomètre, et le myomètre, couche externe de cellules musculaires lisses. C’est par exemple lors de l’accouchement (ou de la parturition plus généralement), que ces cellules musculaires lissent se contractent énormément.

Durant ce TP, nous avons étudié les effets de l’injection de différentes doses de syntocinon, qui est de l’ocytocyne de synthèse ayant donc les mêmes effets que l’ocytocyne naturelle, qui est une hormone hypophysaire responsable des contractions utérines.

-Objectifs :

Ce TP a pour but :
- l’étude de la motricité utérine en fonction de la quantité d’hormone
- perfectionnement de l’utilisation de la technique de l’organe isolé et  de l’utilisation du matériel

1. Matériel et méthodes

1. Analgésie

            Tout d’abord, avant d’étudier la motricité utérine, il nous faut analgésier  une ratte par voie SC à la Brupenorphine  à la dose de 0.03 mg/kg et 0.1mg/mL : une ratte de 270g →doit recevoir la dose de 0.008ml de Brupenorphine.

(0.003*270)/1000=0.0081 mg à injecter          0.008*1/1=0.0081mL a injecter

1. Anesthésie

            15 min après l’analgésie, on anesthésie la même rate par voie IP au Nenbutal 6% à la dose de 40 mg/Kg : une de 270g → il faut donc lui administrer 0,18 mL de Nenbutal pour l’endormir.

40mg -> 1000g
x -> 270g
x = 10.8 mg

6000mg -> 100 mL
10.8 mg -> y
y = 0.18 mL

1. Jalon

• Pendant ce temps on prépare une solution de Jalon (pour une fiole de 1L) :

50 mL de Jalon concentré
-500 mL d’eau distillée
-1 mL de glucose à 50%
-10 mL  de NaHCO3 à 5%
-Compléter au trait de jauge avec de l’eau distillée

1. Opération

Après avoir anesthésiée la ratte, un élève a ouvert une ratte, il écarte les viscères avant de lui retirer son utérus. Il est constitué de deux cornes, qui elles-mêmes peuvent être coupées en deux. On obtient donc 4 cornes utérines utilisables par ratte. Nous avons immédiatement placées le bout de corne dans des boîtes de Pétri remplies de Jalon tiède. Après cette opération, les rattes ont été euthanasiées par injection intracardiaque d’une dose de Nenbutal de 0.18 mL.

[pic 1]

1. Montage

1. Cuve à organe isolé

               Pour maintenir la corne utérine en vie, nous avons utilisé la technique de la cuve à organe isolé : pour se faire, le morceau d’utérus est plongé dans une solution de Jalon. Ce milieu contient les éléments essentiels pour la survie du fragment . Cette solution est maintenue à température constante de 38°c. Nous avons aussi mesuré le volume de notre cuve V=75mL. Enfin, nous avons eu recours à une canne à air comprimé afin d’oxygéner le morceau d’utérus, oxygène étant un élément essentiel à sa survie.

Figure 1 : schéma du montage de la cuve à organe isolé

[pic 2]

1. Essais

              Lors de l’expérimentation, nous nous intéressons à différents paramètres :

• La fréquence des contractions
• L’amplitude des contractions
• Le temps de latence
• Le tonus musculaire

Afin de tester l’effet de différentes concentrations d’ocytocyne sur la motricité utérine, nous réalisons des dilutions en série : il faut donc diluer une solution mère d’ocytocine en plusieurs solutions filles de concentrations différentes. Nous disposons d’une solution mère de syntocinon de 160 mUI/mL. Nous prélevons à chaque fois 1mL de la solution précédente la plus concentrée que nous ajoutons à 1mL d’eau distillé.

Nous nous retrouvons donc avec la gamme de dilution à 1/2 suivante :

• 320 mUI/mL
• 160 mUI/mL
• 80 mUI/mL
• 40 mUI/mL
• 20 mUI/mL

        On introduit V/100mL des solutions de syntocinon dans la cuve, c’est-à-dire 75/100=0,75mL. On calcule alors la concentration efficace d’ocytocyne pour les différentes concentrations :

Méthode de calcul :

R = Cfille/Cmère = Vmère/Vfille
D’où Cfille = (Cmère x Vmère) / Vfille

Vmère étant Vjalon/100 soit 0.75 mL

Tableau de résultats des calculs

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