Contrôle n°2 de biochimie (2ème Année Pharmacie)

Exercice n°1. (07 pts)

1. La composition en acides aminés d’un oligopeptide P est : Lys, Arg, Asp, Thr, Val, Cys.

• Le traitement de P par le réactif d’Edman donne PTH-Cys, par la carboxypeptidase donne Arg.
• La trypsine catalyse l’hydrolyse de P en 2 oligopeptides A et B.

Après hydrolyse acide, A donne 03 acides aminés et après hydrolyse alcaline 04 acides aminés.                 Le traitement de A par le DNFB, suivi d’une hydrolyse acide, donne DNP-Cys.

B après hydrolyse acide ou alcaline, donne 03 acides aminés. Le traitement de B par le DNFB, suivi d’une hydrolyse acide, donne DNP-Thr.

• La chymotrypsine hydrolyse P en 02 oligopeptides C et D.

C hydrolysé par l’acide chlorhydrique, donne Cys et par la soude 02 acides aminés.

Le traitement de D par le DNFB, suivi d’hydrolyse acide, libère DNP-Val.

Quelle est la séquence de P.

2. Ecrivez la formule développée du fragment B.

3. On se propose de séparer les acides aminés du fragment B (pHi : 2.77, 5.64, 11.15) dissous dans             un tampon, pH = 3.1, par électrophorèse sur gel d’amidon.

Schématisez l’électrophorégramme obtenu.

Exercice n°2. (07 pts)

L’acide 1-anilino-8-naphtalène sulfonate (ANS) est un inhibiteur de l’acétylcholine estérase.                   Pour déterminer la nature de l’inhibition, on a mesuré les vitesses initiales d’hydrolyse                               de l’acétylcholine, à différentes concentrations de ce substrat, en absence d’ANS (expérience A),                en présence d’ANS (2,05x104 M) (expérience B).

Le tableau suivant exprime ces expériences. Les vitesses sont exprimées en µM d’acétylcholine hydrolysé par minute et par mg de protéine.

Précisez le type d'inhibition et calculez la constante d'inhibition KI.

Exercice n°3. (06 pts)

Soit la réaction de réduction de l'acétaldéhyde en éthanol, catalysée par l'alcool déshydrogénase:  

CH3-CHO  +  NADH  +  H+  <===>  CH3-CH2OH  +  NAD+

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