Compte rendu lipides du jaune d'oeuf

Nom de l’encadrant :

1/ BUT du TP

Le But du TP est de séparer et de caractériser la composition lipidique du jaune d’œuf. Pour cela nous avons extrait du jaune d’œuf dans un solvant organique (chloroforme/méthanol) pour ensuite séparer et identifier par 2 CCM (chromatographie sur couche mince) les principaux lipides du jaune d’œuf, grâce à leur différence de polarité et de solubilité (hydrophile, hydrophobe)  

2/ PRINCIPE

Les deux méthodes utilisées sont l’extraction des lipides (soluble dans un solvant organique) et la chromatographie sur couche mince.

• Extraction spécifique des lipides :

Le jaune d’œuf étant composé de différentes molécules à la fois hydrophiles et hydrophobes (Lipides) nous avons réalisé un solvant composé de chloroforme, solvant apolaire (organique) et de méthanol, solvant polaire.

Chloroforme/Méthanol : (2 :1) -> donc avec 2 fois plus de chloroforme  

Après mélange les molécules hydrophiles solubles dans les solvants polaires se sont mélangées avec le méthanol alors que les molécules hydrophobes solubles dans les solvants apolaires se sont mélangées avec le chloroforme. Le chloroforme et les lipides étant moins denses que le méthanol et les molécules hydrophiles, on obtient dans notre tube d’essai deux phases dont une liquides contenants les lipides du jaune d’œuf.

• Chromatographie sur couche mince :

Cette méthode est basée sur la différence d’affinités des substances par rapport a la phase stationnaire polaire et la phase mobile apolaire, donc c’est une séparation entre une phase liquide et une autre solide on parle alors d’une absorption.    

• La phase stationnaire est un absorbant solide fixée sur une plaque de gel de silice
• La phase mobile est constituée par un solvant ou un mélange de solvants

La CCM vas nous permettre d’identifier le contenu du surnageant obtenu lors de l’extraction.

Pour la premier CCM on a déposés 13 produits (le 6 et le 7 correspond au jaune d’œuf) sur une plaque de silice qu’on a ensuite placé dans une cuve en verre contenant un solvant apolaire : 20ml hexane(14ml) /éther diéthylique(6ml) /acide acétique(0,2) puis on attend que la phase mobile migrer jusqu’à 1cm du bord supérieur de la plaque (phase stationnaire).

La deuxième CCM a une phase mobile plus polaire : 20ml de solvant dichlorométhane(13ml)/ méthanol(5ml)/eau(0,6ml) on fait cette fois si 6 dépôts avec en position 5 et 6 les produits qui n’ont pas migre dans la première CCM  

[pic 1]

3/ RÉSULTATS ET INTERPRÉTATION

Tableau les références frontales des produits déposés sur la plaque chromatographique n°1

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