Compte rendu de TP : extraction des lipides du jaune d'oeuf

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Chaque fiche doit être complétée par binôme et devra comporter impérativement les points suivants.

Noms et prénoms : 

Séquence / Groupe :

Date du TP :

Nom de l’encadrant :

1/ BUT du TP (5 points)

Le but du TP est d’identifier les principaux lipides présents dans le jaune d’œuf lyophilisé. Tout d’abord, une extraction basée sur la différence de solubilité entre une phase lipidique hydrophobe et une phase soluble dans du solvant d’extraction de chloroforme et de méthanol. Nous allons séparer les lipides qui sont de natures apolaires, des composés polaires du jaune d’œuf. Nous allons faire une chromatographie sur couche mince pour déterminer les composants lipidiques présents dans le jaune d’œuf. Ils seront par la suite analysés et identifiés en étant comparé aux échantillons de lipides témoins. Cette identification est possible grâce aux calculs de rapports frontaux.

2/ PRINCIPE

Présenter le principe des 2 méthodes utilisées (10 points)

Les deux méthodes utilisées dans ce TP sont, l’extraction des lipides du jaune d’œuf et la réalisation de deux chromatographies sur couche mince avec un solvant différent.

La première étape de cette expérience est l’extraction des lipides du jaune d’œuf lyophilisé. On sait que le jaune d’œuf est composé de molécules solubles dans des solvants polaires. De plus, on sait que les lipides ont des propriétés physiques qui leurs permettent d’être insolubles dans les solvants polaires et d’être très hydrophobe. Cette propriété nous permettra de les séparés des autres molécules solubles dans du solvant polaire. Le solvant utilisé est composé de chloroforme et de méthanol qui sont deux molécules hydrophiles. Cette première manipulation nous permet d’isoler les constituants lipidiques du jaune d’œuf. Après l’extraction on observe un surnageant non soluble et on en déduit qu’il s’agit d’une phase lipidique.

3/ RÉSULTATS ET INTERPRÉTATION

Légender clairement les chromatogrammes et ne pas oublier de les joindre au compte rendu (les coller, les agrafer ou les mettre dans une pochette fermée avec le compte-rendu) (5 points).

Dans la 1 ère chromatographie, nous avons utilisé un solvant apolaire constitué d’hexane, d’éther diéthylique et d’acide acétique (70 :30 :1). Or nous voulons seulement 20 ml de ce solvant. Pour l'hexane, nous avons fait 20x70% = 14ml, pour l'éther diéthylique nous avons fait 20x30% = 6ml et pour l'acide acétique nous avons fait 20x1% = 0,2ml. En conclusion, nous avons donc prélevé 14ml d'hexane, 6ml d'éther diéthylique et 0,2ml d'acide acétique pour constituer notre solvant.

Calculer les références frontales de tous les produits déposés sur la plaque chromatographique n°1 (CCM1) et rendre les résultats sous forme d’un tableau clair (5 points).

TABLEAU RECAPULATIF

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