Dénombrement Par étalement D'une Suspension Bactérienne Sur Une Surface D'un Milieu gélosé

Première étape: préparer une suspension mère à partir d'une colonie ou d'une culture jeune de 18h,

Deuxième étape : préparer plusieurs dilutions au 1/10, c'est à dire transvaser 1mL de la suspension mère dans 9mL d'un liquide physiologique stérile en tube à essai pour préparer la dilution 10-1 et continuer ainsi pour les autres dilutions,

Important: agiter les suspensions avant de prélever les 1mL,

Important: utiliser une pipette graduée stérile de 1mL pour la préparation de chaque dilution.

Troisième étape: déposer 0,1 mL de la suspension mère sur la surface d'une gélose nutritive stérile et sèche.

Quatrième étape: utiliser un étaloir stérile pour étaler la suspension sur toute la surface de la gélose.

Important: utiliser la même pipette et le même étaloir si vous commencez par la dilution 10-2, ensuite 10-1 et à la fin la suspension mère.

Changer la pipette et stériliser l'étaloir si vous commencez par la suspension mère.

Incuber toutes les boites 24h à 37°C.

Multiplier le nombre de colonie compté sur la dilution retenue pour le dénombrement par 10 pour déterminer le nombre de colonie par mL si le volume ensemencé est de 0,1 mL.

Multiplier ensuite le nombre trouvé par le taux de dilution retenue pour calculer le nombre de colonie par 1 mL de la suspension mère.

Équation à appliquer = Nombre de colonie compté sur la boite retenue x Volume total de la dilution qui a servi au dénombrement x Taux de dilution

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