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Plan génie génétique

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Par   •  16 Octobre 2020  •  Cours  •  330 Mots (2 Pages)  •  478 Vues

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PLAN GENIE GENETIQUE

LE MATERIEL BIOLOGIQUE

Extraction de l'ADN génomique

Extraction des ARN 3.3

Extraction des plasmides

TECHNIQUES GENERALES UTLISEES EN BIOLOGIE MOLECULAIRE

Les extractions

Les précipitations

La quantification des acides nucléiques

Dosage par photométrie en UV

Estimation par fluorescence en présence de BET

Séparation analytique et préparative de l'ADN

 

LES OUTILS ENZYMATIQUES DU GENIE GENETIQUE

Les enzymes qui coupent

Les endonucléases de restriction

DNAse I

Nucléase S1

Exonucléase III

Bal31

La ribonucléase A

La ribonucléase H

Les enzymes qui ligaturent

L'ADN ligase d'E. coli

La T4 ADN ligase

L'ARN ligase

Les enzymes qui "recopient" un acide nucléique

L'ADN polymérase I

 Le fragment de Klenow

 La Taq Polymérase

 La T7 ADN polymérase (Sequenase)

 La reverse transcriptase

 L'ARN polymérase

 La terminale transférase

 Autres enzymes

 La phosphatase alcaline

 La polynucléotide kinase

 LES SYSTEMES HOTES-VECTEURS

Propriétés générales des vecteurs

Principes généraux du clonage

Systèmes de sélection

Insertion dans un gène de résistance

Insertion dans LacZ

Choix de l'hôte

Les plasmides vecteurs - E. coli

Les plasmides vecteurs de clonage

Les plasmides vecteurs de transcription

Les plasmides vecteurs d'expression

Les plasmides vecteurs de fusion

Les vecteurs phagiques - E. coli

Le phage lambda 6.6.2 EMBL: un vecteur de clonage

Lambda gt11: un vecteur d'expression

Le phage M13

M13mp18/19

Combinaisons plasmide-phage - E. coli

Les cosmides

Les phagemides

Système hôte-vecteur eucaryotique: la levure

Méthodes de transformation

Le vecteur plasmidique 2mu

Les chromosomes artificiels: YAC

Système hôte-vecteur eucaryotique: la cellule animale

Transformation des cellules animales

Cellule hôte et sélection des cellules transformées

L'HYBRIDATION MOLECULAIRE

Sondes et marquage de l'ADN

L'agent de marquage

Les stratégies de marquage

ANALYSE DU GENOME ET DE SES MODIFICATIONS

Le Southern blot

AMPLIFICATION GENIQUE

Amplification génique: les banques d'ADN

Les banques d'ADN génomiques

Les banques d'ADNc

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