Principe chromatographie en couche mince

Principe CCM:

        C'est une chromatographie d'adsorption c'est à dire qu'il y a partage des molécules suivant leur polarité, entre un adsorbant fixe et une phase mobile. Ici les oses sont entraînés par le solvant (phase mobile) qui se déplace par capillarité le long du gel de silice (phase stationnaire). Ils sont alors plus ou moins soumis à une force de rétention (adsorption sur la phase fixe) et à une force d'entraînement (phase mobile). C’est à dire que les plus apolaires (hydrophobes) sont entraînés par la phase organique apolaire (déplacement important) alors que les plus polaires (hydrophiles) ont tendance à rester adsorbés sur la silice (faible déplacement). Il en résulte une migration différentielle des oses aboutissant à leur séparation.

Adsorption : liaisons faibles (dipôle/ion, dipôle/dipôle et force de Van der Waals).

Silice adsorbant fort (= capacité élevée) très polaire.

Spécificité des osidases

        Elles sont spécifiques de la nature (L-Gal, D-Gal, D-Glc…) et de l'anomérie d’un ose impliquant sa fonction réductrice (ou pseudo-aldéhydique ou pseudo-cétonique) dans une liaison osidique.

Exemples de diholosides connus

                        *Réducteurs (une fonction réductrice libre)

                        *Non réducteurs (les 2 fonctions réductrices sont engagées dans la liaison osidique)

Résultats

        Exploiter les chromatogrammes. Donner la formule développée et le nom dans la nomenclature.

Si 2 diholosides possibles (un réducteur, l'autre non) proposer une expérience simple permettant de choisir (liqueur de Fehling bleu, virant au rouge avec réducteur).

Spécificité des osidases

        Elles sont spécifiques de la nature (L-Gal, D-Gal, D-Glc…) et de l'anomérie d’un ose impliquant sa fonction réductrice (ou pseudo-aldéhydique ou pseudo-cétonique) dans une liaison osidique.

Principe CCM:

        C'est une chromatographie d'adsorption c'est à dire qu'il y a partage des molécules suivant leur polarité, entre un adsorbant fixe et une phase mobile. Ici les oses sont entraînés par le solvant (phase mobile) qui se déplace par capillarité le long du gel de silice (phase stationnaire). Ils sont alors plus ou moins soumis à une force de rétention (adsorption sur la phase fixe) et à une force d'entraînement (phase mobile). C’est à dire que les plus apolaires (hydrophobes) sont entraînés par la phase organique apolaire (déplacement important) alors que les plus polaires (hydrophiles) ont tendance à rester adsorbés sur la silice (faible déplacement). Il en résulte une migration différentielle des oses aboutissant à leur séparation.

Adsorption : liaisons faibles (dipôle/ion, dipôle/dipôle et force de Van der Waals).

Silice adsorbant fort (= capacité élevée) très polaire.

L'activation préalable de la plaque par le phosphate disodique, entraîne la formation d'un complexe entre le phosphate et les OH vicinaux en cis du Gal (portés par C3 et C4). D'où migration différentielle du complexe Phosphate/Gal par rapport au Glc (OH vicinaux en trans).

Spécificité des osidases

        Elles sont spécifiques de la nature (L-Gal, D-Gal, D-Glc…) et de l'anomérie d’un ose impliquant sa fonction réductrice (ou pseudo-aldéhydique ou pseudo-cétonique) dans une liaison osidique.

Principe CCM:

        C'est une chromatographie d'adsorption c'est à dire qu'il y a partage des molécules suivant leur polarité, entre un adsorbant fixe et une phase mobile. Ici les oses sont entraînés par le solvant (phase mobile) qui se déplace par capillarité le long du gel de silice (phase stationnaire). Ils sont alors plus ou moins soumis à une force de rétention (adsorption sur la phase fixe) et à une force d'entraînement (phase mobile). C’est à dire que les plus apolaires (hydrophobes) sont entraînés par la phase organique apolaire (déplacement important) alors que les plus polaires (hydrophiles) ont tendance à rester adsorbés sur la silice (faible déplacement). Il en résulte une migration différentielle des oses aboutissant à leur séparation.

Adsorption : liaisons faibles (dipôle/ion, dipôle/dipôle et force de Van der Waals).

Silice adsorbant fort (= capacité élevée) très polaire.

L'activation préalable de la plaque par le phosphate disodique, entraîne la formation d'un complexe entre le phosphate et les OH vicinaux en cis du Gal (portés par C3 et C4). D'où migration différentielle du complexe Phosphate/Gal par rapport au Glc (OH vicinaux en trans).

Spécificité des osidases

        Elles sont spécifiques de la nature (L-Gal, D-Gal, D-Glc…) et de l'anomérie d’un ose impliquant sa fonction réductrice (ou pseudo-aldéhydique ou pseudo-cétonique) dans une liaison osidique.

Principe CCM:

        C'est une chromatographie d'adsorption c'est à dire qu'il y a partage des molécules suivant leur polarité, entre un adsorbant fixe et une phase mobile. Ici les oses sont entraînés par le solvant (phase mobile) qui se déplace par capillarité le long du gel de silice (phase stationnaire). Ils sont alors plus ou moins soumis à une force de rétention (adsorption sur la phase fixe) et à une force d'entraînement (phase mobile). C’est à dire que les plus apolaires (hydrophobes) sont entraînés par la phase organique apolaire (déplacement important) alors que les plus polaires (hydrophiles) ont tendance à rester adsorbés sur la silice (faible déplacement). Il en résulte une migration différentielle des oses aboutissant à leur séparation.

Adsorption : liaisons faibles (dipôle/ion, dipôle/dipôle et force de Van der Waals).

Silice adsorbant fort (= capacité élevée) très polaire.

L'activation préalable de la plaque par le phosphate disodique, entraîne la formation d'un complexe entre le phosphate et les OH vicinaux en cis du Gal (portés par C3 et C4). D'où migration différentielle du complexe Phosphate/Gal par rapport au Glc (OH vicinaux en trans).

Spécificité des osidases

        Elles sont spécifiques de la nature (L-Gal, D-Gal, D-Glc…) et de l'anomérie d’un ose impliquant sa fonction réductrice (ou pseudo-aldéhydique ou pseudo-cétonique) dans une liaison osidique.

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