Cours chromato

𝑉 est alors le volume de phase stationnaire et DI le débit instantané. K définit la répartition du soluté entre les phases. 𝑆

𝐾 = [𝑆𝑜𝑙𝑢𝑡é] 𝑑𝑎𝑛𝑠 𝑙𝑎 𝑝h𝑎𝑠𝑒 𝑠𝑡𝑎𝑡𝑖𝑜𝑛𝑛𝑎𝑖𝑟𝑒 [𝑆𝑜𝑙𝑢𝑡é] 𝑑𝑎𝑛𝑠 𝑙𝑎 𝑝h𝑎𝑠𝑒 𝑚𝑜𝑏𝑖𝑙𝑒

K dépends de la température T. Plus le soluté à une affinité avec la phase stationnaire, plus K est élevé, donc le composé est fortement retenu. Logiquement, 𝑇′𝑅 est alors plus grand aussi (inversement si plus d’affinité avec la phase mobile).

Résolution

Soit le chromatogramme suivant :

La résolution est le rapport entre la distance entre le sommet de 2 pics adjacents sur la moyenne de la largeur de la base des pics, soit la relation

Cette grandeur est sans unité, ce qui veux dire que selon le cas, w est exprimé en unité de volume ou de temps.

Elle permet de définir la qualité de la séparation. Elle est définie expérimentalement et évalue le pouvoir séparatif d’une colonne. La résolution intègre la notion de forme du pic : plus le pic est fin (sélectivité)et isolé (efficacité), meilleure est la résolution. Une bonne résolution suppose que 𝑅𝑠 est proche de 1,5.

Il faut trouver un juste milieu entre un temps d’analyse qui permette une résolution élevée (plus le temps d’analyse est long, plus la résolution augmente) mais assez court pour être rentable.

Les facteurs influençant la résolution sont la :

-Sélectivité : Accessibilité dans le gel

-Efficacité : Dépendant du nombre de plateaux théoriques N, qui lui-même dépends de la taille des billes (plus les billes sont petites, plus il y a de plateaux et plus c’est efficace)

-Capacité : Dépends de la charge en échantillon (plus on charge, moins la résolution est élevée.

C’est pour cela que l’on dit que 𝑅𝑠 = 𝑓(𝑆𝐸𝐶).

On a alors la relation de Purnell :

Capacité

N correspond au nombre de plateau, α représente le facteur de sélectivité et k le facteur de rétention. Le facteur de rétention (ou capacité) est la quantité d’un soluté dans la phase stationnaire par rapport à celle dans la phase mobile :

𝑇 𝑀

Le facteur de rétention k (ou capacité) peut aussi être exprimé en fonction du coefficient de partage K.

D’où𝑇 =(1+𝑘)𝑇 𝑅𝑀

𝑘 = 𝑟

𝑀 𝑜𝑢 𝑎𝑣𝑒𝑐 𝑙𝑒𝑠 𝑉 𝑐𝑜𝑟𝑟𝑒𝑠𝑝𝑜𝑛𝑑𝑎𝑛𝑡𝑠

𝑇−𝑇

𝑇−𝑇 𝑇′ 𝑉 𝑘=𝑟 𝑀=𝑅=𝐾𝑆

𝑇𝑇𝑉 𝑀𝑀𝑀

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