Etude de l’activité d’un antibiothique sur une souche bactérienne

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Compte rendu TP3 :Etude de l’activité d’un antibiothique sur une souche bactérienne.

Lamri Yacoub Siammour Rayane.

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INTRODUCTION

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But du TP:

A travers ce TP nous avons étudié l’effet de l’activité d’un ou plusieurs antibiotiques sur une souche bactérienne (=Escherichia coli) à fin de déterminer la sensibilitée de cette souche au chloramphénicol dans un premier temps puis à différents autres antibiotiques dans un second tempsà partir des résultats nous pourrons detérminer différentes valeurs caractéristiques telles que la CMI et la CI50, l’effet bactériostatique ou encore bactériocide.

Par le biais de ses expériences nous verrons quelle antibiotique est le mieux adapté pour etre administrer chez un patient infecté par Escherichia Coli.

Croissance bactérinne en présence d’antibiotique :

Préparation à faire avant manipulation :

Dans un premier temps pour povoir suivre l’activité de l’antibiotique sur la souche bactérienne on prend la densité optique (DO) de la souche bactérienne initiale qui est de 0,751 que l’on devra diluer dans le bouillion muller Hinton afin d’obtenir une DO finale de 0,125. on se retrouve donc avec un faceur de dillution de 6. Nous allons réaliser la dilution dans un flacon de 36 ml de milieu Muller Hinton (qui est un milieu employé lors des dilutions en milieu liquide pour les bactéries qui sont non éxigeantes et qui ont une croissance assez rapide) pour réaliser la dilution on prélève 5 ml de suspension bactérienne pure que l’on vien diluer dans les 36 ml de milieu Muller Hinton on obtient donc une DO de 0,125 pour la souch bactérienne diluer.

Pour ses éxpérimenations nous avons utilisé le Chlorophénicol à une concentration de 0,4 g/l

 Gélose nutritive :

Nous avons réaliser une gélose nutritive qui à été ensemencé à partir de la suspension bactérienne de 0,5 McF.

Cette gélose nutritive à été réaliser au début de la manipultion permettant ainsi de vérifier l’abscence de contamination de cette souche et ainsi vérifier que nous sommes bien en présence d’une souce pure.

Après 24 heures d’incubation à  37°C nous n’avons observé aucune contamination .

preparation de la gamme de

dilution

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Nous avons réaliser une gamme de 9 tubes dont un témoin (tube 0) à parir de la solution bactérienne diluer (0,5McF).le tube témoin est préparé à partir de de 3ml de cette suspension bactérienne et 3 ml de bouillon Muller Hinton. Puis on prépare le tube 1 avec 3 ml de bouillion Muller Hinton et 3 ml de solution mère d’antibiotique à partir cette solution on réalisera une dilution au ½ du tube 1 à 8 et on ajoute 3 ml de solution bactérienne dans chacun des tubes pour obtenir au final une dilution au ¼ .    

Observation et lecture des résultats :

Exemple de calcul de la concentration d’antibiotique dans le tube 1 :

0,4*1/4= 0,1

Au niveau du T2 nous avons obtenus des résultats abérrants .