TP rein

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Par Marine01261911 • 16 Février 2019 • TD • 775 Mots (4 Pages) • 588 Vues

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Compte-rendu TP rein

Objectif : Identifier parmi trois individus (B,E,C) l'individu sain et les deux patients malades et déterminer leur pathologie.

Pour ce faire, nous avons réalisé un dosage de la créatinine, du glucose et des protéines dans les urines des trois patients à l'aide de différents kits permettant le dosage de ces trois paramètres.

Le dosage en créatinine, protéines et glucose par spectrophotométrie a pour but de déterminer les concentrations de ces molécules dans les urines à partir de gamme étalon (pour les protéines) ou de solution standard ( pour le glucose et la créatinine). Grâce à ces concentrations il sera alors possible de dresser un diagnostic quant à la pathologie dont souffre le patient.

Protocole dosage des protéines :

Préparation des différentes concentrations de BSA

Concentration BSA (µg/mL)

BSA 160µg/mL

62,5µL

125µL

187,5µL

375µL

500µL

Eau

937,5µL

875µL

812,5µL

625µL

500µL

Dosage gamme étalon et des urines des 3 patients :

Tubes	10	20	30	60	80	B	E	C
Eau	700µL
Bio rad protein essay	200µL
Solution BSA	100µL BSA 10 µg/mL	100µL BSA 20 µg/mL	100µL BSA 30 µg/mL	100µL BSA 60 µg/mL	100µL BSA 80 µg/mL
Urine diluée 1/20						100µL provenant du patient B	100µL provenant du patient E	100µL provenant du patient C

Protocole dosage glucose :

Tubes	Blanc	Standard	B	E	C
Eau	10µL
Solution standard		10µL
Réactif	1000µL
Urine non diluée			10µL provenant du patient B	10µL provenant du patient E	10µL provenant du patient C

Protocole dosage créatinine :

Tubes	Blanc	Calibrateur	B	E	C
Eau	60µL
Solution standard		60µL
Réactif 1	300µL
Urine diluée 1/20			60µL provenant du patient B	60µL provenant du patient E	60µL provenant du patient C
Attendre 5 min
Réactif 2	300µL

Résultats :

Voici la courbe étalon que nous avons obtenus après mesure de l’absorbance des différentes concentrations en BSA (10 µg/mL, 20 µg/mL,30 µg/mL,60 µg/mL et 80 µg/mL) préparées précédemment. Sur cette courbe apparaît le coefficient directeur de la droite qui nous permettra de déterminer la concentration en protéines, chez les patients B, E et C.

[pic 1]

Patients	B	E	C
DO protéines	0,182	0,116	0
Concentration en protéines (µg/mL)	y=0,0038x 0,182=0,0038x x=47,9µg/mL mais dilution au 20ème donc dans l’urine x=47,9 x 20 =958µg/mL	y=0,0038x 0,116=0,0038x x=30,5µg/mL mais dilution au 20ème donc dans l’urine x=30,5 x 20= 610µg/mL	Comme l’absorbance est de 0. x=0µg/mL
DO glucose	0,003	1,430	0,016
Concentration en glucose (g/L)	DO solution standard=0,336 pour une solution de 1g/L donc : concentration glucose = 0,003 ÷ 0,336 = 8,93x10-3g/L	DO solution standard=0,336 pour une solution de 1g/L donc : concentration glucose = 1,430 ÷ 0,336 = 4,26g/L	DO solution standard=0,336 pour une solution de 1g/L donc : concentration glucose = 0,016 ÷ 0,336 = 0,05g/L
DO créatinine	0,226	0,143	0,346
Concentration en créatinine (µmol/L)	DO solution standard=0,094 pour une solution de 177µmol/L donc : Concentration créatinine = (0,226 x 177) ÷ 0,094 = 425,55µmol/L mais dilution au 20ème de l’urine : 425,55µmol/L x 20=8511µmol/L	DO solution standard=0,094 pour une solution de 117µmol/L donc : Concentration créatinine = (0,143 x 177) ÷ 0,094 = 269,27µmol/L mais dilution au 20ème de l’urine : 269,27µmol/L x 20 = 5385,4µmol/L	DO solution standard= 0,094 pour une solution de 117µmol/L donc : Concentration créatinine = (0,346 x 177) ÷ 0,094 = 651,51µmol/L mais dilution au 20ème de l’urine : 651,51µmol/L x 20 = 13030,2µmol/L
Ratio albumine/créatinine (mg/mmol)	Albumine : 958µg/mL=958x10-3 mg/mL=958mg/L Créatinine : 8511µmol/L= 8,511mmol/L Ratio = 958 ÷ 8,511 = 112,56mg/mmol	Albumine : 610µg/mL=610x10-3 mg/mL=610mg/L Créatinine : 5385,4µmol/L=5,3854mmol/L Ratio=610 ÷ 5,3854 = 113,27mg/mmol	Ratio= 0

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