Matériel Et méthodes De L'histologie médicale
Dissertations Gratuits : Matériel Et méthodes De L'histologie médicale. Recherche parmi 300 000+ dissertationsPar chabia • 25 Février 2013 • 4 003 Mots (17 Pages) • 1 108 Vues
Chapitre 1
Matériel et méthodes de
l’histologie médicale. Le
concept de tissu
1.1 Matériel et méthodes de l’histologie
médicale
Toute activité histologique a en commun l’action de voir (observer) et d’interpréter ce qui est vu.
Dans toute démarche d’ordre histologique, 4 étapes se succèdent : 1) le choix du matériel à
Étudier,
2) la technique permettant de visualiser les structures ou les phénomènes que l’on veut étudier,
3) la production d’images de ces structures ou de ces phénomènes, par des moyens optiques,
4) l’interprétation de ces images.
L’histologie moléculaire a pour but de visualiser in situ - dans les tissus, les cellules, leurs organites ou la matrice extra-cellulaire (MEC) - des molécules (en particulier les gènes, leurs ARN-messagers et les protéines pour lesquelles ils codent), en déterminant leur situation et leur configuration.
L’histologie moléculaire permet donc de décrire la morphologie cellulaire et tissulaire en termes d’architecture et d’interactions moléculaires.
1.1.1 Le choix du matériel et les modalités de prélèvement
Les méthodes utilisées en histologie varient selon le matériel (échantillons ou specimens) à étudier
et les objectifs de l’examen (diagnostic histopathologique chez l’homme ou chez l’animal, ou protocole
de recherche).
Matériel et méthodes de l’histologie médicale. Le concept de tissu
16/119 Histologie : les tissus - André, Catala, Morère, Escudier, Katsanis, Poirier 2007 - 2008
1.1.1.1 L’observation peut porter sur des préparations où les cellules restent
entières
• Des cellules vivantes peuvent être observées entre lame et lamelle afin d’évaluer certaines de
leurs fonctions (par exemple, mobilité des spermatozoïdes, mesure de la fréquence du battement
des cellules ciliées, chimiotactisme des granulocytes neutrophiles). L’examen microscopique
est parfois effectué après adjonction de colorants vitaux qui permettent d’évaluer la
viabilité cellulaire (bleu trypan, nigrosine qui pénètrent dans les cellules mortes), ou de mettre
en évidence des structures (rouge neutre visualisant les vacuoles de pinocytose).
• Les cultures cellulaires permettent de maintenir des cellules en survie et de les étudier
in vitro. Elles peuvent être réalisées à partir de fragments d’organe ou de cellules dissociées
par action enzymatique, cultivées en suspension ou sur un support auquel elles adhèrent. Ces
techniques sont largement utilisées en recherche mais aussi en diagnostic : ainsi, par exemple,
les caryotypes sont habituellement réalisés sur des cultures de lymphocytes sanguins ou de
cellules du liquide amniotique.
• Des cellules entières fixées peuvent être examinées sur des frottis (étalement de cellules sur
une lame de verre) pour l’étude des cellules sanguines et de celles de différents liquides de
l’organisme (comme, par exemple, le liquide cérébrospinal, du liquide articulaire, du liquide
d’épanchement pleural, du liquide d’ascite) ou sur des empreintes (cellules provenant d’un
fragment d’organe - un ganglion lymphatique par exemple - apposées sur une lame). Ces techniques
peuvent être utilisées pour rechercher des cellules tumorales, comme c’est le cas pour
les frottis cervico-vaginaux de dépistage des cancers du col de l’utérus.
1.1.1.2 Le plus souvent, le matériel est fixé, inclus, coupé et coloré
Les cellules, associées dans des tissus, sont coupées afin de pouvoir les observer au microscope. Il
s’agit d’observer au microscope optique (MO) ou électronique (ME) des cellules, tissus, organes
ou fragments d’organe, voire des organismes entiers (embryons de souris par exemple) qu’une préparation
technique plus ou moins compliquée aura rendues suffisamment minces et transparents
pour être observés et suffisamment contrastés pour y reconnaître les divers éléments constitutifs.
On peut distinguer l’étude des cellules isolées (« cytologie ») et celles des coupes de tissus ou d’organes
(« histologie »).
Les examens histologiques sont en règle réalisés après traitement du matériel par des agents physiques
ou chimiques (fixateurs) qui tuent les cellules mais visent à préserver au maximum leurs caractéristiques
morphologiques et biochimiques.
• Le matériel est prélevé de différentes façons. Le matériel histologique peut être obtenu par
biopsie (directe comme pour la peau, le muscle ou avec endoscopie pour les organes des appareils
respiratoire, digestif, urinaire), par ponction à l’aiguille (comme pour les liquides
pleural, péritonéal, articulaire, pour les ganglions, les seins, la moelle osseuse). Le matériel
histologique peut aussi provenir d’une pièce opératoire, d’une autopsie ou de la dissection
d’organe en expérimentation animale.
• La microdissection
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