Matériel Et méthodes De L'histologie médicale

Chapitre 1

Matériel et méthodes de

l’histologie médicale. Le

concept de tissu

1.1 Matériel et méthodes de l’histologie

médicale

Toute activité histologique a en commun l’action de voir (observer) et d’interpréter ce qui est vu.

Dans toute démarche d’ordre histologique, 4 étapes se succèdent : 1) le choix du matériel à

Étudier,

2) la technique permettant de visualiser les structures ou les phénomènes que l’on veut étudier,

3) la production d’images de ces structures ou de ces phénomènes, par des moyens optiques,

4) l’interprétation de ces images.

L’histologie moléculaire a pour but de visualiser in situ - dans les tissus, les cellules, leurs organites ou la matrice extra-cellulaire (MEC) - des molécules (en particulier les gènes, leurs ARN-messagers et les protéines pour lesquelles ils codent), en déterminant leur situation et leur configuration.

L’histologie moléculaire permet donc de décrire la morphologie cellulaire et tissulaire en termes d’architecture et d’interactions moléculaires.

1.1.1 Le choix du matériel et les modalités de prélèvement

Les méthodes utilisées en histologie varient selon le matériel (échantillons ou specimens) à étudier

et les objectifs de l’examen (diagnostic histopathologique chez l’homme ou chez l’animal, ou protocole

de recherche).

Matériel et méthodes de l’histologie médicale. Le concept de tissu

16/119 Histologie : les tissus - André, Catala, Morère, Escudier, Katsanis, Poirier 2007 - 2008

1.1.1.1 L’observation peut porter sur des préparations où les cellules restent

entières

• Des cellules vivantes peuvent être observées entre lame et lamelle afin d’évaluer certaines de

leurs fonctions (par exemple, mobilité des spermatozoïdes, mesure de la fréquence du battement

des cellules ciliées, chimiotactisme des granulocytes neutrophiles). L’examen microscopique

est parfois effectué après adjonction de colorants vitaux qui permettent d’évaluer la

viabilité cellulaire (bleu trypan, nigrosine qui pénètrent dans les cellules mortes), ou de mettre

en évidence des structures (rouge neutre visualisant les vacuoles de pinocytose).

• Les cultures cellulaires permettent de maintenir des cellules en survie et de les étudier

in vitro. Elles peuvent être réalisées à partir de fragments d’organe ou de cellules dissociées

par action enzymatique, cultivées en suspension ou sur un support auquel elles adhèrent. Ces

techniques sont largement utilisées en recherche mais aussi en diagnostic : ainsi, par exemple,

les caryotypes sont habituellement réalisés sur des cultures de lymphocytes sanguins ou de

cellules du liquide amniotique.

• Des cellules entières fixées peuvent être examinées sur des frottis (étalement de cellules sur

une lame de verre) pour l’étude des cellules sanguines et de celles de différents liquides de

l’organisme (comme, par exemple, le liquide cérébrospinal, du liquide articulaire, du liquide

d’épanchement pleural, du liquide d’ascite) ou sur des empreintes (cellules provenant d’un

fragment d’organe - un ganglion lymphatique par exemple - apposées sur une lame). Ces techniques

peuvent être utilisées pour rechercher des cellules tumorales, comme c’est le cas pour

les frottis cervico-vaginaux de dépistage des cancers du col de l’utérus.

1.1.1.2 Le plus souvent, le matériel est fixé, inclus, coupé et coloré

Les cellules, associées dans des tissus, sont coupées afin de pouvoir les observer au microscope. Il

s’agit d’observer au microscope optique (MO) ou électronique (ME) des cellules, tissus, organes

ou fragments d’organe, voire des organismes entiers (embryons de souris par exemple) qu’une préparation

technique plus ou moins compliquée aura rendues suffisamment minces et transparents

pour être observés et suffisamment contrastés pour y reconnaître les divers éléments constitutifs.

On peut distinguer l’étude des cellules isolées (« cytologie ») et celles des coupes de tissus ou d’organes

(« histologie »).

Les examens histologiques sont en règle réalisés après traitement du matériel par des agents physiques

ou chimiques (fixateurs) qui tuent les cellules mais visent à préserver au maximum leurs caractéristiques

morphologiques et biochimiques.

• Le matériel est prélevé de différentes façons. Le matériel histologique peut être obtenu par

biopsie (directe comme pour la peau, le muscle ou avec endoscopie pour les organes des appareils

respiratoire, digestif, urinaire), par ponction à l’aiguille (comme pour les liquides

pleural, péritonéal, articulaire, pour les ganglions, les seins, la moelle osseuse). Le matériel

histologique peut aussi provenir d’une pièce opératoire, d’une autopsie ou de la dissection

d’organe en expérimentation animale.

• La microdissection

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