Acides nucléiques

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1- Définition de CCM :

 La technique de Chromatographie d’absorption sur Couche Mince est une technique qui permet d’identifier et de séparer les constituants d’un mélange.

Il y a 2 phases pour réaliser une chromatographie :

• Il y a une phase solide qui est stationnaire -> La plaque de silice.
• Et il y a une phase liquide qui est mobile -> Solvant éluant.

 Ici nous vous présenterons la Chromatographie d’absorption sur Couche Mince des glucides supposés être présents dans le jus de fruits.

2-Principe :

Cf mes notes  

• Plaque de gel de silice
• Sur laquelle on va tracer un trait au crayon à papier avec une règle à 2 cm du bas. => Ligne de dépôt
• Mettre un repère à 1 cm de chaque bord pour prévoir les débordements.
• Déposer les échantillons à analyser sur la ligne de dépôt à intervalle régulier. Les mélanges seront placés entre les témoins et non sur les extrémités, à l’aide d’un cure dent pour déposer délicatement les échantillons car la plaque à tendance à s’effriter. Penser à changer de pique de chaque espèce chimique pour ne pas fausser les mesures.
• Placer la plaque à chromatographie dans la cuve à élution, qui est dans la hotte et dans laquelle est placé un éluant. La hauteur du liquide éluant doit-être inférieur à celle de la ligne de dépôt. La cuve doit être bien refermée.
• Laisser l’éluant monter par capillarité jusqu’au ¾ de la plaque.
• Sortir la plaque et tracer un trait au crayon à papier => Ligne de front qui correspond à la montée de l’éluant.
• Toujours sous la hotte on va sécher la plaque au sèche-cheveux.
• Faire révéler les spots incolores grâce à un réactif ici, le réactif de Molisch.
•  Puis la placer dans le four pendant 5minutes.

Comment ça marche ?

La plaque de silice va exercer une force de rétention et la phase mobile : l’éluant, va exercer une force d’entrainement.

(Cette technique consiste à faire migrer les constituants à séparer sur une phase stationnaire immobile, à l’aide d’une phase mobile)

Quels sont les intérêts d'une CCM ?

Le principal intérêt de la CCM est l'identification rapide des composés d'un mélange. En contrepartie, l'analyse est uniquement qualitative et ne permet pas le dosage d'un composé.

Quelles sont les informations que l'on peut extraire de l'étude du chromatogramme ?

L'analyse du chromatogramme montre que :

la molécule responsable dès la taches grises de glucose, de fructose et de saccharose sont identiques à celles des jus de fruits car les taches sont à la même hauteur.

3-Matériel nécessaire :

1. Cuve chromatographique.
2. Plaque C.C.M de silice sur aluminium
3.  Eluant composé de Méthyl éthyl cétone, d’Acide acétique et de Méthanol
4.  Réactif de Molisch composé de Naphtol 1, d’Ethanol et d’Acide sulfurique à 20%.
5.   5 Témoins, ici :

-Glucose

-Saccharose

- Fructose

- Galactose

- Lactose

    6- Jus de fruit ici du jus d’orange.

4-Etapes avec la sécurité et les EPI nécessaires

5-Nos résultats

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1. Présenter nos calculs sous forme de tableau

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