Dosage des o-diphénols dans deux échantillons d’olives noirs issues de variétés différentes
Fiche : Dosage des o-diphénols dans deux échantillons d’olives noirs issues de variétés différentes. Recherche parmi 300 000+ dissertationsPar meamore • 7 Janvier 2017 • Fiche • 1 163 Mots (5 Pages) • 886 Vues
Introduction :
Les composés phénoliques, appelés souvent « polyphénols », sont responsables de la bonne stabilité à l’oxydation des huiles d’olive vierges. Les antioxydants les plus puissants sont Les ortho-diphénols tels que l’hydroxytyrosol, l’acide caféique L'oléuropéine ….
Les olives, feuilles et la pulpe d'olive contiennent de grandes quantités d'hydroxytyrosol récupérés pour produire des extraits hydroxytyrosol qui sont utilisées à des fins médicales pour leurs propriétés immunostimulantes et antibiotiques.
[pic 1]
Structure de l’hydroxytyrosol
Outre leur propriété anti-oxydante des o-diphénols, possèdent d’intéressantes propriétés nutritionnelles et organoleptiques.
L’hydroxytyrosol se trouve sous forme d’acide elenolic et ester oleuropéine dans l’huile d’olive vierge et après sa dégradation, il y a formation de l'oléuropéine qui confèrent aux huiles vierges une saveur amère et une sensation de piquant.
[pic 2]
Structure de L'oléuropéine
L’acide caféique est un composé organique naturellement présent dans toutes les plantes car il intervient dans la biosynthèse de la lignine. Dans l’olive noire il est présent à une teneur de 2,10 mg/100g.
[pic 3]
Structure de l’acide caféique
Dans ce présent TP, On s’intéresse au dosage des o-diphénols dans deux échantillons d’olives noirs issues de variétés différentes.
I-Principe :
Cette méthode consiste à extraire les ortho diphénols à partir d’échantillon d’olive en utilisant l’acétone comme solvant.
La méthode est basée sur la formation de complexes entre les o-diphenols et les ions molybdate, formant un complexe jaune.
Le dosage absorptiométrique des ortho-diphénols est réalisé 370nm.
II-Mode opératoire :
- Extraction :
- Peser 5mg de chacun des échantillons d’olive 1 et 2, mélanger chacun d’eux avec 10 ml d’acétone à 50%, dans un bêcher.
- Homogénéiser pendant 5mn, en utilisant du papier aluminium pour éviter l’évaporation du solvant.
- Centrifuger à 3000 tr/5mn.
- Filtrer le mélange sur un entonnoir recouvert du papier Whatman.
- Laver le filtrat obtenue avec 5ml d’hexane et refaire l’opération une deuxième fois afin d’éliminer les substances apolaires.
- Centrifuger à 3000 tr/3mn.
- Filtrer le mélange sur un entonnoir recouvert du papier Whatman.
- Le filtrat obtenu est considéré comme extrait.
Après l’extraction, on procède au dosage.
- Dosage :
- Préparer dans des tubes à essai le mélange suivant :
- 2 ml d’extrait.
- 500 µl de réactif de molybdate de sodium à 5%.
- Laisser pendant 10mn.
- Lire l’absorbance au spectrophotomètre à 370 nm.
- Gamme étalon :
La concentration d’un composé phénolique, l’acide gallique, sera déterminée grâce à une gamme étalon. Pour cela :
- A partir d’une solution d’acide gallique de 1 mg/ml, préparer les dilutions suivantes :
Dilution | 1 /5 | 2 /5 | 3/5 | 4/5 |
Acide gallique (µl) | 40 | 80 | 120 | 160 |
Diluant (µl) | 160 | 120 | 80 | 40 |
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