Compte rendu sur la photosynthèse 14 mars 2013

Compte rendu sur la photosynthèse 14 mars 2013

Mesure de l’activité photosynthétique chez les plantes supérieures.

Table des matières

I/ Introduction ................................................................................................................... 1

II/ Matériels et méthodes .................................................................................................. 2

III/ Résultats et explications ............................................................................................... 3

Donnés :...................................................................................................................................................................................3 Résultats :................................................................................................................................................................................3 Concentration en chlorophylle :.....................................................................................................................................3 Activité photosynthétique : ..............................................................................................................................................3

IV/ Questions Particulières................................................................................................. 4

Calculer les concentrations d’accepteurs et donneurs d’électrons et de l’herbicide dans la cuve de mesure...................................................................................................................................................................................... 4 Cuve n°2....................................................................................................................................................................................4 Cuve n°3....................................................................................................................................................................................4 Cuve n°4....................................................................................................................................................................................4 Cuve n°5....................................................................................................................................................................................4

Avec quels intermédiaires réactionnels photosynthétiques pourraient interagir les donneurs et accepteurs d’électrons artificiels ?...............................................................................................................................4 Comparer « l’efficacité » des accepteurs ferricyanide et DCBQ. Donner un schéma du transfert d’électron en présence de ferricyanide et DCBQ. .................................................................................................. 5

Cas du FeCN :..........................................................................................................................................................................5

Cas du DCBQ :.........................................................................................................................................................................6

Pourquoi est-il nécessaire de déterminer la concentration de Chl par l’extraction d’acétone ? ......6 Pourquoi la membrane de Téflon est-elle indispensable pour l’électrode de Clark ?...........................6

V/ Conclusion..................................................................................................................... 6

I/ Introduction

La photosynthèse est un processus biologique qui permet aux plantes et à des bactéries de synthétiser de la matière organique à l'aide de la lumière comme source d’énergie. Ce processus a 2 phases, l'une qui crée un gradient de proton à l'aide de cascade de réaction

KHALFAOUI Karim & DUMAS Julien

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Compte rendu sur la photosynthèse 14 mars 2013

d'oxydoréduction (phase lumineuse) et la seconde (phase obscure) est une réduction de dioxyde de carbone grâce au produit de la réaction de la phase lumineuse.

La membrane des thylakoïdes est située à l'intérieur des chloroplastes des organismes réalisant la photosynthèse. Cette membrane est composée de centres réactionnels photochimiques, le photosystème I et le photosystème II, reliés par une plastoquinone, la plastocyanine et le complexe membranaire cyt b6/f . C'est dans le photosystème II, que se déroule l'oxydation de l'eau en oxygène grâce aux photons absorbés. Ceci crée une force protonmotrice et une source d'électron. C'est à partir de cette force que l'on a pu mesurer l'activité photosynthétique des thylakoïdes. Pour cela, nous allons extraire les chloroplastes contenus dans les feuilles d'épinards. Ensuite, nous mesurerons l'activité de la suspension des thylakoïdes à 670 nm et celle des chlorophylles à 645, 652 et 663 nm.

Grâce à ces mesures, nous déterminerons les concentrations en chlorophylle de ces suspensions.

Et pour finir, grâce à la mesure de production de dioxygène, nous allons mesurer l'activité photosynthétique (en présence de réactifs tels que le ferricyanide, le DCBQ (DiChloro-p-BenzoQuinone) et le DCMU (DiChloro-p-diMéthylUrée)).

II/ Matériels et méthodes

Pour commencer nous travaillerons dans de la glace, car les protéases agissent à température ambiante et nous risquerions de détruire la chlorophylle, ainsi que pour bloquer les réactions qui pourraient s’y produire. Nous avons extrait les thylakoïdes à partir de feuilles d’épinard, placées dans un milieu hypertonique pour qu’il y ait éclatement des cellules de chloroplastes. Le milieu hypertonique (solution A) est composé de tampon phosphate (pH 7,5 ) de NaCl et de sucrose . La différence de concentration créera un mouvement d'eau de l’extérieur de la cellule vers l’intérieur ce qui provoquera l'implosion de la cellule de chloroplaste. Le filtrat sera ensuite filtré pour récupérer les structures à étudier et éliminer les composés qui pourraient gêner l’expérience. Après filtration nous procédons à une

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